miRNA全套服务
1. miRNA典型的完整项目服务 客户提供样本,包括细胞,组织或者血液样本。提取总RNA,miRNA芯片试验,miRNA芯片数据的生物分析,得到候选的符合预期的miRNA候选群组,针对候选的miRNA群组进行qRT-PCR验证。根据验证 结果筛选获得候选的代表性的microRNA,进行功能分析。转染miRNA mimics,microRNA inhibitors可以研究调控miRNA所引起的生物学效应,并通过下游的基因表达分析或者表型分析,可以确定特 点miRNA的靶标基因及其功能。典型的试验设计包括:转染mimic或者inhibitor,或者还可以共转染带有miRNA结合位点的报告基因载体系统,下游的检测包括报告载体分析,qRT-PCR、芯片分析、蛋 白分析。 2.miRNA生物信息学预测及其功能检查 客户提供相应的候选miRNA,根据客户提供的候选miRNA,我们做靶标基因的生物信息学预测,根据预测的结果,进行miRNA与带有miRNA结合位点的报告基因载体系统进行结合位点的确认。通过 microRNA反义技术,miRNA的RNAi干扰技术以及相应的miRNA mimics 或microRNA inhibitor进行试验的佐证和二次确认试验。 3.客户订制实验服务 根据客户实验以及周期要求,针对具体实验阶段或者试验要求,设计实验,完成客户指定的某一流程的服务。
microRNA研究相关数据库与预测、功能分析软件
融合Targetscan,PicTar,miRanda等软件操作,更方便更简单,首推软件:http://bioinfo.univ-rouen.fr/mirabel/
miRNA研究更多工具:
1.miRBase: http://www.mirbase.org miRBase序列数据库是一个提供包括已发表的miRNA 序列数据、注释、预测基因靶标等信息的全方位数据库,是存储miRNA信息最主要的公共数据库之一。miRBase提供便捷的网上查询服务,允许用 户使用关键词或序列在线搜索已知的miRNA和靶标信息。
2.miRecords: http://mirecords.biolead.org/ 动物 miRNA 的靶相互作用的数据库, 包括人工收集实验验证的, 预测的 miRNA的靶目标. 靶标预测工具DIANA-microT, MicroInspector, miRanda, MirTarget2, miTarget, NBmiRTar, PicTar, PITA, RNA22, RNAhybrid, and TargetScan/TargertScanS.
3.PMRD: http://bioinformatics.cau.edu.cn/PMRD/ PMRD是一个关于植物MicroRNA 数据库,包括了microRNA序列和它们的靶基因、二级结构、表达谱、基因组搜索等等,并且该数据库尝试着整合大量的关于植物microRNA的数据。
4.CoGeMiR: http://cogemir.tigem.it/ CoGeMiR数据库总结关于在进化过程中MicroRNA 在不同动物中的保守性。该数据库搜集已知的和预测的microRNA关于染色体定位、保守性和表达谱方面的信息。
5.MicroRNAdb: http://bioinfo.au.tsinghua.edu.cn/micrornadb/index.php MicroRNAdb是一个关于microRNA的综合性数据库。相比其他数据库,MicroRNAdb搜集的microRNA更完整且进行了充分的注释。如今,该数据库有732个microRNA序列的条目和439个详细的注释。
6.miRWalk: http://www.ma.uni-heidelberg.de/apps/zmf/mirwalk/ miRWalkis是一个综合性数据库,提供来自人类、小鼠和大鼠的miRNA的预测信息和经过验证的位于其靶基因上的结位点。 7.TarBase: http://diana.cslab.ece.ntua.gr/tarbase/ TarBase数据库人工搜集了实验验证过的miRNA的靶基因,包括在人、小鼠、果蝇、蠕虫和斑马鱼中的miRNA的靶基因,区分出这些miRNA靶基因中的对的和不对的。
8.miRGator:http://genome.ewha.ac.kr/miRGator/miRGator.html miRGator数据库是一个引导对miRNA进行功能阐释的工具。功能分析和表达谱结合靶基因预测,可以对miRNA的生物学功能进行推测。
9.miRGen:http://www.diana.pcbi.upenn.edu/miRGen.html miRGen是一个整合型数据库,包括:(i)动物miRNA和基因组元件之间的位置关系;(ii)通过结合广泛使用的靶基因预测程序得到动物miRNA靶基因。
10.miRNAMap:http://mirnamap.mbc.nctu.edu.tw/ miRNAMap数据库搜集了多个物种的经过试验证明的microRNA和miRNA靶基因,其中包括人类的、小鼠的、大鼠的以及其他多细胞动物的基因组。
11.Vir-Mir:http://alk.ibms.sinica.edu.tw/cgi-bin/miRNA/miRNA.cgi Vir-Mir数据库提供预测的病毒miRNA的候选发夹结构序列。
12.ViTa:http://vita.mbc.nctu.edu.tw/ ViTa数据库搜集来自miRBase、ICTV、VirGne、VBRC等数据库的病毒数据,包括了已知的病毒的miRNA以及相应的由 miRanda和TargetScan预测的宿主miRNA靶基因。ViTa还提供有效的注释,包括 人类miRNA的表达情况,病毒感染的组织等。
13.ASRP Database:http://asrp.cgrb.oregonstate.edu/db/ ASRP网站组织了拟南芥中的小RNA的信息,这些小RNA是通过ASRP或其他实验室分离得到的。 14.miRNApath:http://lgmb.fmrp.usp.br/mirnapath/tools.php miRNApath是一个关于miRNA、靶基因以及代谢通路的的数据库。
15.miRex:http://miracle.igib.res.in/mirex/ miRex是一个分析microRNA基因表达的在线资源库,搜集,整理和分析已发表的关于microRNA基因表达的数据,它允许研究者通过数千数据点来分析基因表达和提供microRNA基因表达数据的在线 保存。
16.PolymiRTS:http://compbio.uthsc.edu/miRSNP/ 自然产生的miRNA的靶标位点DNA变异的数据库.
17.SeqBuster:http://estivill_lab.crg.es/seqbuster/ a bioinformatic web interface able to custom analyze deep sequencing data to study miRNA variants or isomiRs. From Genetic Causes of Disease Group, Genes and Disease Program, Centre for Genomic Regulation (CRG), Pompeu Fabra University, Barcelona, Catalonia, Spain.
18.WMD3: http://wmd3.weigelworld.org./cgi-bin/webapp.cgi WMD3 designs artificial microRNAs (amiRNAs). The 21mer amiRNA21mers can specifically silenceg single or multiple genes of interest in more than 90 plants. From Max Planck Institute for Developmental Biology, 72076 Tübingen, Germany.
19.TargetScan:http://www.targetscan.org/ TargetScan是通过搜索和每条miRNA种子区域匹配的保守的8mer和7mer位点来预测靶基因。
20.microRNA.org:http://www.microrna.org/ miRanda数据库提供了关于人类、果蝇和斑马鱼基因组的microRNA靶目标的预测信息以及miRNA在不同组织的表达谱。
21.PicTar: http://www.pictar.org/ icTar是通过一定计算法则来鉴定microRNA的靶目标的。该可搜索的网站可以提供以下物种的关于microRNA靶目标的预测详细信息,包 括:脊椎动物、七个果蝇种类、三个线虫种类和人类的非保 守但共表达的microRNA的靶目标(例如:表达在同一组织的microRNA和mRNA)。
22.RNAhybrid:http://bibiserv.techfak.uni-bielefeld.de/rnahybrid/ RNAhybrid是一种用于寻找一条长链RNA和一条短链RNA的最小配对自由能的工具,是通过一种域码来实现的。例如一条短链序列结合到长链的最佳位置上。该工具主要作为microRNA靶基因预测用.
23.microInspector:http://bioinfo.uni-plovdiv.bg/microinspector/ microInspector提供miRNA结合位点的预测。
24.TripletSVM: http://bioinfo.au.tsinghua.edu.cn/mirnasvm/ TripletSVM是一个用于预测一个具有发夹结构的被查询序列是否是一个真正的miRNA前体物的程序.
25.TransmiR: http://cmbi.bjmu.edu.cn/transmir TransmiR是关于转录因子的microRNA调节的数据库,对于用于学术研究室免费的。 26.miR2Disease:http://mlg.hit.edu.cn:8080/miR2Disease/search.jsp miR2Disease数据库是一个人工注释的数据库,主要收录的是与人类疾病相关的microRNA信息.
27.S-MED: http://www.oncomir.umn.edu/SMED/index.php S-MED(肉瘤microRNA表达数据库)是一个存储miRNA表达谱的数据库,这些miRNA是在多种人的肉瘤中以及一些选择的正常组织中发现的。
28.PMRD:http://bioinformatics.cau.edu.cn/PMRD/ 植物microRNA数据库
29.deepBase: http://deepbase.sysu.edu.cn/ deepBase从新一代测序技术(深度测序技术,deep-sequencing)数据中注释和鉴定microRNA,piRNA,siRNA基因及长非编码RNA基因及其他们的表达模式。
30.starBase: http://starbase.sysu.edu.cn/ starBase 从高通量的CLIP-Seq实验数据(CLIP-Seq和HITS-CLIP)和降解组实验数据中(degradome sequencing)搜寻micorRNA的靶标。提供了各式各样的可视化界面去探讨microRNA的靶标
31.PITA: http://genie.weizmann.ac.il/pubs/mir07/mir07_data.html PITA基于靶位点的可接性(target-site accessibility)预测microRNA的靶标。
32.RNA22:http://cbcsrv.watson.ibm.com/rna22.html RNA22基因序列特征预测microRNA的结合位点。
33.miRTarBase:http://mirtarbase.mbc.nctu.edu.tw/index.html 一个全面收集已被实验验证的microRNA靶标数据库。
34.miRanda: http://www.microrna.org/microrna/home.do miRanda是John等于2003年5月开发的第一个miRNA靶基因预测软件。miRanda适用范围广泛,不受物种限制,同时提供了 windows,linux,和macintosh多平台版本,可以下载到本地运行。碱基互补 方面,miRanda算法和Smith-Waterman算 法相似,但它以碱基互补(如A=U,G≡C等)代替Smith-Waterman算法中的碱基匹配(如A-A,U-U等)来构建打分矩阵,允许G=U错 配,为了体现miRNA3’ 端和5’端和靶基因作用过程中的不对称性,软件给出了scale参数(5’端11个碱基得分值乘以该值,然后和3’端11个碱 基得分值相加作为碱基互补得分)。同时强调miRNA第2到4位碱基和靶基因 精确互补,第3到12位碱基和靶基因错配不得多于5个,9到L-5(L为 miRNA总长)位碱基至少一个错配,最后5个碱基错配不得多于两个。 35.DIANA-microT: http://www.microrna.gr/microT DIANA-microT是KiriakidouM等基于实验和计算生物学方法开发的miRNA靶基因预测软件。和miRanda预测结果中可能出 现一个miRNA对应多个靶位点或多个miRNA对应一个靶位点而丢掉了miRNA调 控单个靶位点不同的是,DIANA-microT考虑了miRNA调 控单个靶位点的情况。DIANA-microT预测算法基于以下两点来判别miRNA靶基因:①miRNA和靶基因间的高亲和力,主要通过结合能来衡量。 ②影响miRNA和靶基因所形成二聚体茎环结构环部位置和环大小的miRNA相关蛋白可能指导miRNA和靶基因的相互作用。 36.RNAhybrid: http://bibiserv.techfak.uni-bielefeld.de/rnahybrid/ RNAhybrid是Behmsmeier M等[15]基于miRNA和靶基因二聚体二级结构开发的miRNA靶基因预测软件。RNAhybrid预测算法禁止分子内、miRNA分子间及靶基因间 形成二聚体,根据miRNA和靶基因间 结合能探测最佳的靶位点。尽管随着靶基因序列长度增加,运算复杂度也相应增加,但RNAhybrid和其它RNA二 级结构预测软件诸如mfold, RNAfold, RNAcofold和pairfold相比,仍具有明显的速 度优势。此外,RNAhybrid允许用户自定义自由能阈值及p值,也允许用户设置杂交位点的 偏向,如杂交位点必须包含miRNA 5’端2-7nt等。
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